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硅片表面的几种处理方法和步骤一、 硅 片的 预处理 ( 1)硅片切割根据所需大小,用玻璃刀进行硅片的切割。操作时需要在洁净的环境中,并带一次性手套, 以避免污染硅片。 先在桌面平铺一张干净的称量纸, 用镊子小心夹持硅片的边缘,将其正面朝上(光亮面)放于称量纸上;再取一张干净的称量纸覆盖于硅片表面,留出硅片上需要切割的部分;将切割专用的直尺放于覆盖硅片的纸上,用手轻轻压住直尺;直尺应不超过待切割侧的纸面, 以防止直尺污染硅片; 切割时玻璃刀沿直尺稍用力平行滑动,使用的力量以能在硅片表面形成一清晰的划痕, 但不至于将硅片划开为度; 如对大块硅片进行横纵向多次切割,即可在硅片表面形成网格;将硅片包裹于称量纸内, (避免手套和硅片表面直接接触) 用手沿网格线轻轻掰动即可形成大小合适的小型硅片; 将切割好的硅片用镊子小心夹持,放于干净的塑料平皿内,正面朝上, 并用封口膜将平皿封好, 放于干净处保存待用。注意整块硅片取出后严禁放回硅片盒,应另行保存。二、 硅 基片表面的 羟基化 处理( 2) 在通风橱内,将切割好的小型硅片置于干净的羟化烧杯(专用)中,将其正面朝上,用去离子水清洗 3 次,清洗时稍用力,使硅片能够在烧杯中旋转起来,以减少硅片之间的摩擦碰撞; 将水倒净, 立即用移液管 (过氧化氢专用) 往烧杯中加入 5ml 过氧化氢 ( H2O2 ) ,然后用移液管(浓硫酸专用)加入 15ml 浓硫酸( H2SO4 ) ,在摇床上缓慢振荡或静置 30分钟使之充分反应, 此反应可使表面羟基化。 倒掉上步反应的液体, 用去离子水清洗 3 次。清洗时稍用力, 使硅片能够在烧杯中旋转起来, 以减少硅片之间的摩擦碰撞; 然后将烧杯口向下倾斜, 缓慢转动烧杯, 使烧杯壁上的浓硫酸能被洗去。 清洗结束后, 用大量水保存硅片 ,并需要使硅片的正面保持朝上。二、硅基片表面的 氨基化 处理( 3) 取出氨化烧杯(专用) ,先用无水乙醇清洗 2 次,然后倒入 20ml 无水乙醇,将步骤( 2)反应后的获得的羟基化硅片转移到氨化烧杯中,用无水乙醇清洗 3 次。清洗时同步骤(2) ,使硅片处于乙醇环境中;清洗完成后倒掉乙醇,迅速加入 3-氨基丙基三乙氧基硅烷( APTES )和无水乙醇的混合液(体积比为 1 15) ,或者先加 15ml 无水乙醇,然后用移液管加 1ml APTES , 摇床上振摇反应 2 h 。该反应结束后可以使硅片表面氨基化。三、硅基片的 羧基化 处理( 4) 倒掉上步反应液体,用无水乙醇清洗 3 次,清洗过程同上。清洗完后把硅片转移到羧基化烧杯(专用)中,烧杯中 含琥珀酸酐的无水乙醇饱和溶液 ,摇床振摇反应 3 h 以上或者过夜, 该反应结束后可使硅片表面羧基化。 将反应结束后的硅片用无水乙醇清洗后, 保存于大量无水乙醇中待用。 注意要保持各专用烧杯的清洁,处理过程中的硫酸要收集到废液瓶中,并做好标记。经过上述步骤处理后的硅片表面已修饰有羧基官能团,再经过 NHS/EDC (简称 NE)活化后可与蛋白配基分子的氨基形成共价连接。四、硅基片的 甲基化 处理上接步骤( 2) ,接下来取出甲基化烧杯(专用) ,用三氯乙烯清洗,以形成三氯乙烯环境,将羟基化后的硅片用镊子小心夹持,放入疏水烧杯中,正面朝上;用三氯乙烯清洗 3 次,清洗过程同上。 倒掉液体,将 20ml 三氯乙烯和 3ml 二氯二甲基硅烷 在专用的烧杯中混合均匀,再倒入盛有硅片的疏水烧杯中,反应 5 分钟;用无水乙醇清洗,再用三氯乙烯清洗;如此循环反复 3 次,将硅片用镊子小心夹持取出, 放在盛有大量无水乙醇溶液的容器中,用封口膜封存。 注意挥发性试剂的操作都必须在通风橱内进行。粘有硅烷的移液管和烧杯应立即用无水乙醇清洗。五、硅基片的 醛基化 处理上接步骤( 3) ,倒掉反应液体,用无水乙醇清洗 3 次,以除去氨基硅烷;再用去离子水清洗 3 次,以除去无水乙醇,以避免其与醛基反应;然后用 PBS 溶液清洗 2 次,以形成 PBS环境,倒掉 PBS 溶液,将硅片亮面朝上,加入 戊二醛和 PBS 的混合溶液( 15 ml PBS ,1.5 ml 50 %戊二醛,体积比为 110 ) ,摇床振摇反应 1 h。此反应结束后可使硅基片形成醛基化。倒掉反应液体,用大量 PBS 清洗 3 次,然后将醛基化的硅片保存于 PBS 溶液中,以待下一步实验使用。
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